QB∕T 5601-2021 口腔清洁护理用品 牙膏和口腔清洁护理液中溶菌酶抗菌活性的测定[轻工]
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D9C4398E394349B09BBA8F3876ACA115 |
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0.26 |
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页数： |
12 |
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日期： |
2021-10-27 |
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ICS 71.100.40,CCS Y43 D,中华人民共和国轻工行业标准,QB/T 5601- 2021,口腔清洁护理用品牙膏和口腔清洁护理液,中溶菌酶抗菌活性的测定,Oral care and cleansing products - Determination of the antibacterial activity,f enzymes in toothpastes and oral rinses,2021-05-17 发布2021-10-01 实施,中华人民共和国工业和信息化部发布,QB厅5601 一2021,刚吕,本文件按照GB厅1.1一2020 ((标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定,起草,本文件由中国轻工业联合会提出,本文件由全国口腔护理用品标准化技术委员会牙膏分技术委员会(SACrrC 492/SC 1) 归口,本文件起草单位:江苏雪豹日化有限公司、黑龙江省轻工科学研究院、广州质量监督检测研究,院、浙江方圆检测集团股份有眼公司,本文件主要起草人:陈新宇、徐志良、李鑫宇、刘文玉、谈红、税锢、张劲松、夏泽敏、杨铭,本文件为首次发布,QBrr 5601 一2021,口腔清洁护理用品,牙膏和口腔清洁护理液中溶菌酶抗菌活性的测定,1 范围,本文件描述了牙膏和口腔清洁护理液中溶菌酶抗菌活性测定的术语和定义、方法要点、试剂与标准,物质、仪器与设备、测定步骤和结果表示,本文件适用于牙膏和口腔清洁护理液中溶菌酶抗菌活性的定性测定,j主:本文件所指牙膏和口腔清洁护理液指以二氧化硅为基质或者以二氧化硅为主复配其他摩擦剂的牙膏和口腔清洁,护理液产品，不包括以月桂醇硫酸醋纳为发泡剂的产品,2 规范性引用文件,下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件:不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单〉适用于本,文件,GB!f 6682 分析实验室用水规格和试验方法,GB!f 35919 口腔清洁护理用品分类和术语,3 术语和定义,GB!f 35919界定的术语和定义适用于本文件,4 方法要点,利用溶菌酶专一性水解敏感菌(溶壁微球菌)细胞壁的特点，以活性染料共价标记的细菌细胞壁为,底物，用琼脂扩散法进行鉴定。当细菌细胞壁完整性遭到破坏时，琼脂板上会形成清晰的透明圈，从而,定性鉴定在膏体及溶液中的溶菌酶活性的存在,5 试剂与标准物质,5.1 除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和GB!f 6682 规定的三级水,5.2 溶菌酶标准品:蛋清lysozyme ，酶活力二三20 000 U/mg, CAS 号12650-88-30,5.3 冻干色源底物:按照附录A 规定的方法制备,5.4 琼脂粉BR 级生物试剂,5.5 氢氧化锅,5.6 磷酸二氢铀C NaH2P04.2血0) ,5. 7 磷酸氢二纳CN皿HP04. 12H20 ),5. 8 0.1 mol/L磷酸盐缓冲液CpH 6.5) :,QBIT 5601- 2021,一一溶液A (0.2 mollL 磷酸氢二纳)称取7 1. 46 g 磷酸氢二锅(5.7) ，用水溶解并定容至,1000 mL;,一一熔液B (0.2 mollL 磷酸二氢纳)称取3 1.21 g 磷酸二氢纳(5.6) ，用水溶解并定容至,1000 mL;,-J悔32 mL溶液A 与68 mL榕液B 混合，使用时用去离子水稀释1 倍，即为0.1 mollL pH 6.5 磷,酸盐缓冲液,5.9 1%冻干色源底物溶液:称取0 .1 g 冻干色源底物，加入10 mL磷酸盐缓冲液(5.8) 中，充分混匀,后各用,5.10 2%琼脂溶液:称取2g 琼脂粉于250 mL 三角烧瓶中，加入100 mL水，备用,6 仪器与设备,6. 1 高速离心机:转速不小于8000 r/mino,6.2 电子天平:精度0.001 g ,6.3 恒温培养箱,6.4 灭菌锅,6.5 电炉,6.6 冰箱,6. 7 超净工作台,6.8 微量移液器两支20μL~200μL、100μL~1 000μL ,6.9 移液枪头20μL~200μL 移液器配套枪头、100μL~1 000μL 移液器配套枪头,6.10 打孔器:φ10mm,6. 11 培养皿zφ90mm,6.12 离心管5 mL、50 mL,6.13 三角烧瓶250 mL,6. 14 容量瓶1 000 mL,6. 15 精密试纸pH 6 .4，..，， 8.0 ,7 测定步骤,7. 1 灭菌,将培养皿、打孔器、离心管、移液枪头分别用牛皮纸包好放入灭菌锅;将配制好的2%琼脂溶液,0.1 mollL pH 6.5磷酸盐缓冲液放入灭菌锅， 121 0C ，灭菌20min ,7. 2 色源底物琼脂平板的制备,取2%的琼脂溶液100 mL，灭菌处理后室温放置，冷却至约65 0C ，加入1%冻干色源底物溶液10 mL,混匀后小心倒入培养皿内(φ90mm，每块平板约25 mL""""30 mL) ，水平放置。待凝固后，置于洁净工,作台内约2h，或置于4 0C冰箱存放至次日使用。使用前用无菌打孔器在平板上打出所需的孔洞(孔洞的,间距不小于10 mm) ，弃去孔中琼脂块，形成完整空穴备用,2,7. 3 样品的前处理,7. 3. 1 称取含酶产品1 g 于,需轻缓摇晃至完全溶解,7.3.2 水剂样品用,7.3.3 根据试样中,7. 4 加样,7.5 恒温培养,8 结果表示,QB厅5601- 2021, 室温下放置过夜，期间,(5 .肘，混匀后备用,用标准酶溶液作,)……
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